采用純培養方法對玻利維亞進口商品鹽樣品的嗜鹽微生物進行分離培養,通過 16S rRNA 基因的測序和序列相似性分析,確定所分離菌株的分類地位。在此基礎上,對該樣品中的嗜鹽微生物群落組 成和物種多樣性進行系統研究,并且選取部分代表菌株進行胞外酶活及拮抗作用測定。恒溫培養箱、恒溫震蕩培養箱,上海一恒科學儀器有限公司; PCR 儀,北京東勝創新生物科技有限公司; 電泳儀,北京六一生物科技有限公司; 凝膠成像系統,上海天能公司; 臺式高速離心機,湖南湘儀離心機儀器 有限公司; YXQ-75SII高壓蒸汽滅菌鍋,上海博迅醫療生物儀器股份有限公司。
在不同 pH 條 件下從玻利維亞商品鹽樣品中分離得到的優勢物種不 盡相同。在 pH 為 7. 5 和 8. 5 的培養基分離的嗜鹽古菌 中,分別有 107 株、30 株來自 Halobacterium 屬,分別占所 分離菌株的 56. 9%、58. 8%,說明 Halobacterium 屬菌株玻利維亞商品鹽可培養嗜鹽古菌組成( 屬級水平) Fig.3 Composition of cultivable halophilic archaea from commercial salt of Bolivia ( genus level) 注: 不同顏色代表不同屬嗜鹽古菌,色塊高度代表該屬占比。 為該 pH 生境中的優勢物種 。在 pH 為 9. 5 的條件下共分離到 9 株嗜鹽古菌,其中有 7 株來自 Natrialba 屬,占比 77. 8%,說明 Natrialba 屬菌株為 嗜鹽嗜堿類群,也成為較高 pH 條件下的優勢物種 。而在 pH 為 8. 0 和 9. 0 的培養基中,嗜鹽 古菌種類分布較均勻,優勢種的優勢地位并不明 顯: 在 pH8. 0 條件下 Halobacterium 屬菌株最多,有 42 株,占比 21. 5%; 在 pH9. 0 條件下 Halopenitus 屬 菌株最多,有 22 株,占比 35. 5% 。玻利維亞安第斯山脈附近分布有眾多的高鹽環境,其中鹵水型礦床形成于封閉匯水盆地內,多以鹽湖的 形式露出于地表。