1.1 原料
實驗室自制果汁,并在室溫下開蓋放置36 h,果汁與空氣直接接觸,使果汁在自然環境條件下污染一 定濃度的雜菌.
1.2 培養基 普通營養培養基:胰蛋白胨 5 g,酵母浸粉 2.5 g,葡萄糖 1.0 g,瓊脂粉 15.0 g,pH 值 7.0,去離子水 1 000 mL,121 ℃滅菌30 min.
1.3 主要儀器與設備 YXQ-LS-70A型高壓滅菌鍋(上海博訊實業有限公司醫療設備廠);BGE-240型烘干箱;SW-CJ-2D型潔凈工作臺;LRH-70型生化培養箱.
1.4 含菌培養皿的準備 本文采用直徑為9 cm的培養皿(表面積為3.14×4.52=63.585 cm2 ),按照平板菌落計數法測定自制果 汁中細菌污染情況,重復3次,取平均值.
然后吸取自制飲料1.0 mL均勻涂布至普通培養基上,涂布后的 含菌培養基上細菌分布密度可由公式(1)計算得到.
1.5 潔凈工作臺乙醇輔助紫外殺菌效果的確定 將21個含菌培養基分為7組,分別置于潔凈工作臺(操作空間為1150×500×500 mm)中,將培養皿蓋 打開,
然后開啟紫外燈(40 W)照射30 min,每隔5 min取出1組培養皿. 潔凈工作臺中均勻噴入10 mL 75%乙醇溶液,然后按照上述方法將開蓋的含菌培養基置于潔凈工作 臺中紫外燈照射30 min,
未經紫外線照射的作為陰性對照,取出的培養皿于37 ℃條件下培養24 h,進行 細菌總數計數,取3次重復的平均值.
1.6 潔凈工作臺無菌環境維持時間的確定 將開蓋的含菌培養基置于潔凈工作臺中,采用乙醇輔助紫外線照射25 min,然后將紫外燈關閉,
培養 皿繼續置于潔凈工作臺中48 h,每隔12 h取出1組培養皿,置于37 ℃下培養24 h,進行菌落計數,每組3 個重復,取平均值.